El colorante SAVI 01 ya lleva tres años
funcionando sin problemas.
Como posible defecto se podría aducir
que el color verde-azulado que toma la celulosa no es muy intenso y
que el color rojo de la lignina es rojo-fucsia.
En este tiempo he ido probando mezclas
que tambien sirven para dar en un solo paso tinciones
diferenciales, es decir, un color para las ligninas y otro distinto
para las celulosas.
Cambié el Verde Rápido por Azul de
Astra, que produce azules más intensos. Este tipo de mezclas se
vienen denominando en muchas referencias (sobre todo portuguesas y
brasileñas) como “Safrablau”. Las concentraciones y los
disolventes empleados son distintos según los autores.
Empecé empleando Isopropanol como
disolvente (ya que normalmente es más “amable” que otros
alcoholes), por lo que bauticé a esas mezclas con el nombre de SASIP
(Safranina-Astra-Isopropanol).
El resultado, después de bastantes
pruebas, ha sido satisfactorio, como puede comprobarse en los
siguientes ejemplos:
Digitalis thapsi (hoja tr) Tinción SASIP |
Tomate (tallo tr) Tinción SASIP |
Mercurialis tomentosa (tallo tr) Tinción SASIP |
No obstante, todos los SASIP probados
tienen el inconveniente de producir un precipitado en forma de agujas
pardas que obliga a filtrar la mezcla. Aunque el filtrado es
totalmente válido (ver los ejemplos anteriores) no es
fisico-quimicamente muy ortodoxo. Ello me ha llevado abandonar el
Isopropanol y probar como disolvente de estas mezclas el Etanol.
Después de varias pruebas he llegado a
una mezcla que considero satisfactoria, sin precipitados, en medio
hidro-alcohólico y que denomino SAS.
Como no dispongo de otro Azul de Astra
que el proporcionado por Euromex, y de momento ignoro tanto el
disolvente como la proporción colorante-disolvente, formulo mi SAS
de la siguiente manera:
MEZCLAR:
1 volumen de SAFRANINA 0,2 % en
mezcla a partes iguales de Agua-Etanol
1 volumen de AZUL de ASTRA “Euromex”
Habrá que dejar transcurrir unos meses
para comprobar el comportamiento, pero de momento no se le ve
intención de precipitar ni estropearse.
Los resultados son similares a los de
los SASIP, como puede comprobarse en el siguiente ejemplo:
Todos los ejemplos se han hecho con
cortes realizados con el MICROTOMO ESTOCÁSTICO (ver entrada anterior del Blog).
El corte de Digital se ha realizado a partir de una muestra seca de mi herbario ¡ del año 1.993 ! humedeciendo la muestra en alcohol de 70º previamente a realizar los cortes.
El corte de Digital se ha realizado a partir de una muestra seca de mi herbario ¡ del año 1.993 ! humedeciendo la muestra en alcohol de 70º previamente a realizar los cortes.
El resultado, como puede verse es: Lignina rojo; Celulosa y pectinas azul.
El MODUS OPERANDI queda así de sencillo:
- Corte en agua (si se quiere se puede tratar antes por hipoclorito para "vaciar" contenidos celulares y destacar más las paredes)
- SAS, unos 5 minutos
- Lavado en agua
- IPA hasta no cesión de color (no lavar con Etanol, pues se llevará parte de la Safranina)
- Montar en Laca de uñas (también admite montaje en resinas).
El MODUS OPERANDI queda así de sencillo:
- Corte en agua (si se quiere se puede tratar antes por hipoclorito para "vaciar" contenidos celulares y destacar más las paredes)
- SAS, unos 5 minutos
- Lavado en agua
- IPA hasta no cesión de color (no lavar con Etanol, pues se llevará parte de la Safranina)
- Montar en Laca de uñas (también admite montaje en resinas).