lunes, 9 de enero de 2017

SAVI, SASIP y SAS



 El colorante SAVI 01 ya lleva tres años funcionando sin problemas.

Como posible defecto se podría aducir que el color verde-azulado que toma la celulosa no es muy intenso y que el color rojo de la lignina es rojo-fucsia.

En este tiempo he ido probando mezclas que tambien sirven para dar en un solo paso tinciones diferenciales, es decir, un color para las ligninas y otro distinto para las celulosas.

Cambié el Verde Rápido por Azul de Astra, que produce azules más intensos. Este tipo de mezclas se vienen denominando en muchas referencias (sobre todo portuguesas y brasileñas) como “Safrablau”. Las concentraciones y los disolventes empleados son distintos según los autores.

Empecé empleando Isopropanol como disolvente (ya que normalmente es más “amable” que otros alcoholes), por lo que bauticé a esas mezclas con el nombre de SASIP (Safranina-Astra-Isopropanol).

El resultado, después de bastantes pruebas, ha sido satisfactorio, como puede comprobarse en los siguientes ejemplos:

Digitalis thapsi (hoja tr)   Tinción SASIP





Tomate (tallo tr)  Tinción SASIP


Mercurialis tomentosa (tallo tr)  Tinción SASIP



No obstante, todos los SASIP probados tienen el inconveniente de producir un precipitado en forma de agujas pardas que obliga a filtrar la mezcla. Aunque el filtrado es totalmente válido (ver los ejemplos anteriores) no es fisico-quimicamente muy ortodoxo. Ello me ha llevado abandonar el Isopropanol y probar como disolvente de estas mezclas el Etanol.

Después de varias pruebas he llegado a una mezcla que considero satisfactoria, sin precipitados, en medio hidro-alcohólico y que denomino SAS.

Como no dispongo de otro Azul de Astra que el proporcionado por Euromex, y de momento ignoro tanto el disolvente como la proporción colorante-disolvente, formulo mi SAS de la siguiente manera:

MEZCLAR:

1 volumen de SAFRANINA 0,2 % en mezcla a partes iguales de  Agua-Etanol
1 volumen de AZUL de ASTRA “Euromex”


Habrá que dejar transcurrir unos meses para comprobar el comportamiento, pero de momento no se le ve intención de precipitar ni estropearse.

Los resultados son similares a los de los SASIP, como puede comprobarse en el siguiente ejemplo:


Hinojo (tallo tr)   Tinción SAS



Todos los ejemplos se han hecho con cortes realizados con el MICROTOMO ESTOCÁSTICO (ver entrada anterior del Blog).
 El corte de Digital se ha realizado a partir de una muestra seca de mi herbario ¡ del año 1.993 ! humedeciendo la muestra en alcohol de 70º  previamente a realizar los cortes.


El resultado, como puede verse es: Lignina rojo; Celulosa y pectinas azul.


El  MODUS OPERANDI  queda así de sencillo: 

- Corte en agua (si se quiere se puede tratar antes por hipoclorito para "vaciar" contenidos celulares y destacar más las paredes)

- SAS,  unos 5 minutos

- Lavado en agua

- IPA hasta no cesión de color (no lavar con Etanol, pues se llevará parte de la Safranina)

- Montar en Laca de uñas (también admite montaje en resinas).